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抗艾滋病的蛋白药物

据联合国艾滋病规划署和世界卫生组织的统计,至1998年底全球艾滋病感染者达3340万人,每年新感染者580万人。每天有16000人死于艾滋病。在某些国家,HIV已使成人死亡率成倍增加,艾滋病死亡成为成人死亡的首要死因。非洲的艾滋病更令人担忧,2000年元月美国一份国家情报评估预测,南部非洲四分之一的人口可能由于艾滋病丧生,例如在津巴布韦成人HIV感染率占到25.84%,而死于此疾病的人数还会继续增加。
中国面临日益严重的艾滋病的威胁,根据中国疾病控制中心(CDC)2003年发布的报告中国已有840,000人感染了艾滋病毒,已发病住院的80,000多人,2004年感染人数已达壹佰万,预计2010年将达到壹仟万艾滋感染者,将成为我国人民健康和社会安定的严重问题。因此抗艾滋病药物的研发已成当务之急。
抗艾滋病的蛋白药物研究进展
(1)已完成实验室研究
我们根据HIV-1 gp41上的两段七肽重复(heptad repeat,HR)序列1和2(HR1和HR2)对HIV-1的侵入有抑制作用。但HR1和HR2为34至50个氨基酸的多肽,只能以昂贵的化学合成方法制备。为了解决这个问题,我们进行了HR1和HR2的多螺旋蛋白结构与抗病毒活性的研究,所设计的五螺旋蛋白的基因为HR12121。通过氨基酸连接子(Linker)将三个HR1的基因和二个HR2的基因连接在一起形成的一种五螺旋蛋白HR12121的基因。我们还设计了HR212,通过Linker将两个HR2和一个HR1基因连接在一起形成的三螺旋蛋白HR212的基因。根据上述基因,利用pET-28a表达载体或GST融合表达载体表达HR12121和HR212蛋白,结果表明上述两种蛋白在大肠杆菌中以可溶性蛋白的形式高效表达。其产量在实验室条件已达细胞总蛋白的40%左右。圆二色谱分析证明HR12121和HR212蛋白发现这两种蛋白富含α螺旋结构,这表明HR12121和HR212蛋白非常稳定,不像多肽那样容易降解。经抑制HIV-1侵入细胞的实验,HR12121蛋白具有很高的抑制病毒侵染细胞的活性,其半数抑制浓度为9.5±0.43 nM和2.8±0.63 nM。本研究表明表达纯化的上述多螺旋蛋白,对HIV-1侵染细胞有很高的抑制活性。现已申请专利(申请号:200510064469.2,见附件),因抗艾滋病药物有重要开发价值,可通过“快速通道”申报,可在1-2年内完成临床前研究,申报临床实验。如有愿投资开发者,签订意向书后,可申请专利提前公布和授权。
(2)国外研究进展和我们开发的抗艾滋蛋白药物的优越性
国外研究发现HIV-1 gp41上的HR2多肽具有融合抑制活性,并且其中的一个HR2多肽(T-20)已于2003年3月通过美国食品和药物检验局(FDA)“快通道”批准,成为第一个阻止HIV-1进入细胞的抗艾滋病的多肽药物,其治疗效果良好。然而这类多肽药物系人工化学合成,其成本很高,在美国注射T-20一年要花费两万美元,在欧洲一年要花费两万五千美元,昂贵的药费使得T-20的应用受到了限制。因此,寻找一种具有这种多肽抑制活性,但制备成本低廉的药物是非常必要的。目前我们所构建的抗HIV-1侵染的多螺旋蛋白与T-20具有相同的活性,但其成本只有T-20的1/10。现已申请专利 “一种抑制囊膜病毒感染的多螺旋蛋白及其编码基因与应用”。囊膜病毒含有许多引起人类重大疾病的病毒,其中抗艾滋病毒的蛋白药物是最重要的。
已申请国内专利。

发表时间:2008-9-16
 
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